超微量分光光度计校准方式

发布时间：2025-06-09

以下是详细解析，涵盖核心步骤、技术要点及注意事项：

一、仪器自校准功能

1. 原理与目的

  超微量分光光度计通常内置自校准程序，通过仪器自带的标准参数(如暗电流校正、光源强度补偿)对光学系统进行初始化标定。

自校准可快速修正电子漂移、光源老化等引起的偏差，是日常维护的基础步骤。

2. 操作步骤

  (1) 进入仪器菜单，选择“自校准”或“性能验证”模式；

（3) 仪器自动调整至出厂预设参数，并生成校准报告。

3. 局限性

  自校准无法纠正波长偏移或光路物理变化(如光纤位移)，需结合其他方法定期验证。

二、外部标准溶液校准

1. 适用场景

  当仪器用于定量分析(如核酸、蛋白浓度测定)时，需通过标准溶液验证吸光度准确性。

  常用标准物质包括：

  (3) NIST追溯标准溶液(如重铬酸钾溶液)：用于多波长交叉验证。

2. 操作要点

 (3)空白对照：使用同批次溶剂(如超纯水)作为参比，避免溶剂杂质干扰。

三、波长校准

1. 必要性

  波长准确性直接影响定性分析(如特征吸收峰识别)。

  超微量仪的氙灯光源或LED光源可能发生波长漂移，需定期校验。

2. 校准方法

 (3) 软件校准：部分机型支持自动扫描标准滤光片，通过算法修正波长偏移。

四、稳定性与重复性检测

1. 短期稳定性

 (1)连续测量同一标准样品(如1 mg/mL BSA溶液)至少6次，记录吸光度值(如280 nm下误差应<±0.005 OD)；

 (2)使用标准溶液周期性验证(如每周一次)，记录偏差趋势。

五、特殊注意事项

1. 基座清洁与维护

 (2)定期检查光纤探头是否磨损，避免光损失。

2. 环境控制

 (2)避开强电磁场(如离心机、微波炉)，防止信号噪声。

3. 溯源性与合规性